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[主观题]

在一个实验系统中，你将一克隆的基因、RNA聚合酶、转录因子X和四种核苷三磷酸混合在一起，结果你检测到了转录。然而你如果在系统中同时加入组蛋白，则没有转录发生。但是如果你先让转录因子与DNA保温一段时间后再加入组蛋白和RNA聚合酶，则仍然能观测到转录的进行。试问你从以上实验中能得到什么结论？

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发布时间：2023-02-02

更多“在一个实验系统中，你将一克隆的基因、RNA聚合酶、转录因子X和四种核苷三磷酸混合在一起，结果你检测到了转录。然而你如果在系统中同时加入组蛋白，则没有转录发生。但是如果你先让转录因子与DNA保温一段时间…”相关的问题

第1题

c-fos基因是FBJ鼠骨肉瘤病毒所携带的癌基因的细胞内同源基因。它的功能未知，c-fos的激活是对于生长因子的最

早的转录反应之一。在小鼠细胞中，c-fos的转录水平在5min内显著增加，在10～15min时达最大值之后突然下降。为了研究人类c-fos基因的瞬时诱导的机制，可以克隆一个DNA片段，它含有全长的转录单元，这个转录单元起始于转录起始点上游-750bp处，终止于+1.5kb的poly(A)加入位点(图13-3-60(1)A)。当把这个克隆转至小鼠细胞中时(我们可以较为容易区分克隆与内源性c-fos基因的mRNA)，一天后加入血清(富含生长因子)刺激细胞生长。你发现同样的瞬时诱导(图13-3-60(2)A)。尽管与小鼠基因相比，时间上有略微的延长。

通过分析一个类似增强子元件(SRE血清反应元件)的一系列缺失突变体，发现在转录起始点上游的300核苷酸序列对于在加入血清后增强转录是必需的。通过建立包含有人β-球蛋白部分基因(它编码一个极为稳定的mRNA)的各种杂交基因来研究c-fos mRNA的稳定性。球蛋白基因的结构和两种杂交基因如图13-3-60(1)B、C、D所示。在低血清浓度下，当杂交基因转染鼠细胞时，24小时后它才对血清作出反应(图13-3-60(2)B、C所示)。

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第2题

假定你从黏质沙雷氏菌中克隆了一个基因，并推测可能是依赖于锌的金属蛋白酶，因为它含有两个组氨酸和一个谷氨

酸与锌形成锌指结构。请你设计一个方案，改变其中一个组氨酸看看是否改变蛋白酶的活性？

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第3题

克隆的进行依赖于各种参与DNA新陈代谢的______的使用，它们主要是从原核细胞中分离的。______能够将DNA切割成

特定大小的片段。各种各样的DNA聚合酶也是克隆所必需的，包括将RNA转录出单链DNA的______。DNA______用于连接限制性片段。克隆也需要来源于微生物的DNA序列，包括用来运载被______克隆载体。质粒载体来源于天然细菌质粒，通常携带有______抗性基因。其他载体来源于噬菌体，如λ噬菌体，它们经过修饰后可以运输外源DNA。要想克隆一个感兴趣的真核生物的基因就必须先制作一个能与该基因杂交的______。人们已经发展了很多有效而精细的技术来分析克隆的DNA。例如，极微量的DNA片段可以通过______得到扩增。在感兴趣基因的启动子上连接，如______或______之类的______基因能够定量检测基因的活性。

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第4题

为了弄清楚趋化因子受体的结构与刺激识别、信号转导以及适应其功能之间的关系，可从Salmonella typhimurium克

隆天冬氨酸受体基因。与此同时，也可克隆此受体的丢失了C末端35个氨基酸的基因的突变形式。通过转导使野生型截短了的基因进入丢失了天冬氨酸受体正常基因的突变的鞭毛菌(Salmonella)中。测试两类克隆基因间的功能差异时发现，截短了的受体仍含甲基化靶标的序列，这在细胞中是不能被甲基化的。天冬氨酸与野生型受体、截短了的受体的结合，与它与细胞内正常受体的结合是一样的，克隆受体较正常情况多15倍。

为了检验克隆受体的信号转导过程和分析它们的适应特征，可将含受体的细菌接受天冬氨酸浓度突然变化这一刺激。在缺乏引诱物的情况下，野生型菌株每隔几秒钟改变一次转动(摆动)方向。一旦加入引诱物，转动方向改变这一活动被抑制，因而引起一段时期的平衡活动。若引诱物浓度保持恒定(即使浓度很高)，野生型菌株很快适应，再次开始每隔几秒钟一次的摆动。为观察在实验条件下这些行为的改变，你可粘连细菌的鞭毛到盖玻片上，以便观察它们转动的方向。加入天冬氨酸并计算在加入天冬氨酸后1分钟未改变转动方向的细菌的数目。野生型细胞和含克隆天冬氨酸受体的细胞的结果如图14-3-27。

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第5题

正在研究的是包含三个基因的基因家族。在转录开始后差不多同一时间里细胞质中出现三个基因的mRNA分子。曾经提

出如下假设：合成的是单个转录物，以三种不同的方式(可能是随机地产生三种mRNA分子)加工。主要证据是所有这三种mRNA分子的帽子邻接着同一顺序的四个核苷酸。整个基因家族已经作为一个单位克隆在质粒pBR322中。将质粒DNA部分变性，并在DNA-RNA形成杂交的条件下加入所有这三种mRNA分子。这样，一些质粒分子具有R环，也就是说，DNA的一股链与mRNA结合，而不是与其互补链结合并形成泡状结构。在含这些mRNA的质粒的电镜照片中可以看到图13-3-71中的分子(也能见到其他形式的分子)。上述假设正确吗？

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第6题

功能基因组学将会解决储存在基因组中的遗传语言，（)。

A.揭示基因之间相互作用和关系

B.大规模、系统的研究基因功能及其在生理和病理过程中的作用

C.揭示单基因和多基因协同表达和功能相互作用的奥秘

D.认识、分离、鉴定、克隆所有基因

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第7题

通过实验手段将某植物生物合成途径中的一个基因完全缺失，然而并没有观察到产物合成量的明显改变，为什么？

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第8题

下列关于伦琴的叙述，正确的有哪些？（)

A.一生在物理学许多领域中进行实验研究工作

B.1985发现了X射线

C.1901年被授予首次诺贝尔物理学奖

D.Rn元素是以伦琴命名的

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第9题

为了形成稳定突变，需从重组克隆宿主（E.coli)中构建Pseudomonas aeruginosa的基因文库，并把该基因文库中克隆

为了形成稳定突变，需从重组克隆宿主(E.coli)中构建Pseudomonas aeruginosa的基因文库，并把该基因文库中克隆的突变基因转入一野生型组织。用已知的接合和质粒不相容性知识设计一方案。

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第10题

作为分子克隆的载体，一般应具备哪些条件（)

A.在合适的位置具有至少一个多克隆位点，供外源DNA插入以形成重组体分子

B.克隆载体能携带外源DNA片段进入受体细胞，或停留在细胞质中能自我复制，或整合到染色体DNA上随染色体DNA的复制一起被复制

C.克隆载体必须具有用于选择克隆子的标记基因

D.克隆载体必须是安全的，不应含有对受体细胞有害的基因，并且不会任意转入受体细胞以外的其他生物细胞，尤其是人的细胞

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第11题

质粒pHUBI DNA是双链环状，长5.7kb（5.7×103个碱基对)。这个质粒带有某基因，它的蛋白质产物使宿主细菌对四环素

质粒pHUBI DNA是双链环状，长5.7kb(5.7×10³个碱基对)。这个质粒带有某基因，它的蛋白质产物使宿主细菌对四环素具有抗性(Tet-r)。该DNA对下列每种限制酶具有一个识别位点：EcoRI、HpaI、BamHI、PstI、SalI、BglII。在BarnHI和SalI位点处克隆会破环四环素抗性；在其他酶的位点处克隆则保留四环素抗性。用各种限制酶以及酶混合物消化可得到如表16-2-11所列的DNA片段。试在pHUBIDNA图上标出所有这些酶的切点。将DNA图画成环形，在圆周上以5.7kb总长标出刻度。

表16-2-11

酶混合物

片段长度(kb)

EcoRI

EcoRI，BamHI

EcoRI，HpaI

EcoRI，SalI

EcoRI，BglII

EcoRI，PstI

PstI，BglII

BglII，HpaI

5.7